Mutations Discordantes De Type De Virus De L’immunodéficience Humaine, y compris KN, Observé Dans Le Liquide Céphalorachidien Et Le Plasma

Mutations Discordantes De Type De Virus De L’immunodéficience Humaine, y compris KN, Observé Dans Le Liquide Céphalorachidien Et Le Plasma

Des mutations de résistance discordantes ont été observées dans le virus de l’immunodéficience humaine de type VIH isolé à partir de prélèvements de sang et de liquide céphalorachidien CSF prélevés chez des patients. A notre connaissance, il s’agit du premier cas d’infection par le CSF. les inhibiteurs non nucléosidiques de la transcriptase inverse, et cette découverte peut indiquer que le virus dans le LCR se réplique indépendamment du virus dans le compartiment sanguin

Des taux élevés d’ARN du VIH de type VIH dans le LCR sont associés à une maladie neurologique, principalement une déficience cognitive et une démence franche La capacité des médicaments antirétroviraux à supprimer les niveaux d’ARN du VIH dans le liquide céphalorachidien est inférieure à la limite de détection. ces médicaments pour traverser la barrière hémato-encéphalique Une préoccupation particulière serait l’émergence, dans le LCR, du VIH – avec la mutation KN, qui confère une résistance de haut niveau aux inhibiteurs non nucléosidiques de la transcriptase inverse NNRTI; l’éfavirenz, la névirapine et la délavirdine Les rapports de pharmacorésistance du virus isolé du LCR ont été limités aux descriptions de la résistance aux inhibiteurs nucléosidiques de la transcriptase inverse et aux inhibiteurs de la protéase L’objectif de cette étude était d’analyser les résistances à toutes les classes des antirétroviraux dans des échantillons de CSF et de plasma prélevés chez des patients ayant des charges élevées de virus plasmatiques, malgré des tests de résistance HAARTGenotype ont été réalisés sur des échantillons appariés de CSF et de plasma en utilisant des techniques de séquençage. l’utilisation de l’ADN-b de l’ADN-B ramifié de Bayer-ARN; Bayer Tous les échantillons ont ensuite été génotypés avec l’utilisation du système de séquençage d’ADN automatisé OpenGene; Logiciel GeneObjects, version; et la génétique TruGene HIV-assay Visible Bref, nous avons utilisé la PCR de la transcriptase inverse pour amplifier une séquence -kb du gène VIH-pol sous accord avec Roche Molecular Systems Cette séquence contient le gène de la protéase et des sections de la transcriptase inverse du VIH L’ADN complémentaire généré par cette RT-PCR a ensuite été séquencé dans des réactions séparées qui englobaient l’ensemble du gène de la protéase, le début des codons du gène de la transcriptase inverse, et le milieu des codons du gène de la transcriptase inverse. réactions ont été chargées dans un gel d’acrylamide et les résultats ont été lus à l’aide du Génétique visible de la tour de lecture longue. Les résultats ont été comparés aux séquences de souches de VIH de type sauvage et de laboratoire connues en utilisant le logiciel GeneObjects et des mutations ont été notées. les hommes et les femmes ont subi une ponction lombaire et une phlébotomie Un consentement éclairé a été obtenu conformément aux lignes directrices des commissions d’examen des établissements locaux pour les recherches. Les patients ayant des antécédents d’antirétroviraux et des mutations de résistance aux antirétroviraux ont été décelés chez des patients n’ayant pas d’antécédents de traitement antirétroviral, le VIH du CSF et du plasma présentait des mutations du gène de la protéase L et LP Les patients et l’échec virologique expérimenté pour les premiers schémas thérapeutiques qu’ils ont reçus Pour le patient, le VIH du CSF a révélé des mutations associées à la résistance aux INNTI et à la résistance à l’azidothymidine KN et KR, respectivement. Aucune mutation n’a été observée dans les Spécimen de plasma Une mutation de résistance à la lamivudine MV a été observée dans le VIH à partir d’échantillons de CSF et de plasma prélevés sur le patient, et une mutation du gène de la protéase secondaire a également été observée chez les patients infectés par le LCR. des médicaments antirétroviraux Pour le patient, il n’y avait pas de mutations associées à la résistance aux médicaments du VIH provenant du LCR ou plasma; chez le patient, le VIH provenant à la fois du LCR et du plasma présentait des profils de résistance identiques, y compris KN dans le VIH isolé des deux compartiments; et pour le patient, le VIH provenant du LCR et du plasma présentait des mutations de résistance primaire identiques mais des mutations secondaires discordantes dans les gènes de la protéase et de la transcriptase inverse.

Tableau View largeTélécharger slideHIV- génotypes mutations de résistance aux médicaments et les niveaux de VIH-ARN dans les échantillons de plasma et de CSF obtenus chez les patientsTable View largeTélécharger slideHIV- génotypes mutations de résistance aux médicaments et les niveaux de VIH-ARN dans les échantillons de plasma et de CSF des mutations ont pu être observées chez le VIH isolé à la fois du LCR et du plasma; Cependant, chez le patient, la mutation KN n’a été observée que dans le VIH du CSF. Il s’agit du premier signalement d’une mutation de résistance NNRTI KN dans le VIH provenant du LCR et est particulièrement préoccupant pour les patients recevant des INNTI, en particulier à cause de le haut niveau de résistance croisée aux INNTI Nous avons précédemment montré que la concentration d’éfavirenz, un puissant INNTI, est de% dans le LCR, inférieure à sa concentration dans le plasma Ce niveau relativement faible de pénétration du médicament peut permettre le développement de résistances. virus dans le LCR avant le développement du virus résistant dans le plasma L’apparition de la mutation KR associée à la résistance à l’azidothymidine s’est produite chez un patient qui n’avait pas reçu ce médicament, ce qui soulève la possibilité que le patient ait contracté un virus pharmacorésistant. des mutations de la transcriptase inverse, V / M et KQPEA, n’est pas claire Parce que seul le génotype prédominant est détecté par le test que nous avons utilisé, les différences dans les mutations du VIH-f Les profils de résistance discordants dans le LCR du VIH dans le plasma et dans le plasma peuvent limiter l’efficacité des futurs traitements antirétroviraux et peuvent affecter le développement de troubles neurocognitifs liés au VIH, malgré de récentes preuves encourageantes. de l’effet du HAART sur la fonction neurocognitive chez les patients infectés par le VIH-